疑惑：

實(shí)驗(yàn)中，需要用移液槍來(lái)移液，槍頭滅菌了但槍不能滅菌，怎么實(shí)現(xiàn)無(wú)菌操作？要移的液體量只有幾十微升用移液管不好實(shí)現(xiàn)，主要是擔(dān)心槍里面的無(wú)菌情況，在吸打時(shí)那些空氣是直接接觸液體的呀。

支招：

1.有可以滅菌的移液槍，如果沒有 還是用吸管好 別圖省事~或者可以用紫外線進(jìn)行照射，表面滅菌還可以。

2.槍頭滅菌，移液槍70％酒精擦拭。移液時(shí)注意慢吸快打，移液量不超過(guò)槍頭2/3即可。

3.你可以在槍頭上部塞上脫脂棉再去滅菌，然后再使用。

4.我看用移液槍的問(wèn)題關(guān)鍵在于你要求的無(wú)菌級(jí)別高低以及操作的規(guī)范和熟練程度。我現(xiàn)在做活菌計(jì)數(shù)就用移液槍做梯度稀釋，沒有問(wèn)題，很少有雜菌污染。

體會(huì)：

1.移液槍可以浸泡在75%酒精中過(guò)夜，甚至更長(zhǎng)時(shí)間；

2.移液時(shí)槍盡量不要碰到器皿壁；

3.最好在超凈工作臺(tái)上操作，超凈工作臺(tái)內(nèi)的空氣可以認(rèn)為是無(wú)菌的，這樣吸進(jìn)槍管中的空氣很少，可以認(rèn)為樣品不會(huì)被污染； 

4.操作熟練程度關(guān)系實(shí)驗(yàn)成敗，建議你先用普通肉湯培養(yǎng)基，和其他非實(shí)驗(yàn)菌進(jìn)行操作練習(xí)，熟練后再進(jìn)行你的正式試驗(yàn)。 

5.關(guān)鍵是滅菌的tip頭是要有脫脂棉的tip頭，然后對(duì)移液槍進(jìn)行表面消毒就行了。 

6.其實(shí)不用那么麻煩，你可以將一般的移液槍放在超凈臺(tái)中，打開紫外燈滅菌半小時(shí)，使用時(shí)先將移液槍用（70％－75％）酒精棉擦拭表面，然后在酒精燈火焰上2cm左右處將移液槍反復(fù)吹打幾次即可。有網(wǎng)友是這么操作的，也沒有出現(xiàn)染菌的問(wèn)題！ 

7.移液槍放置在超凈臺(tái)中和臺(tái)子一起紫外滅菌半小時(shí)；槍身用75%酒精擦拭；槍頭塞入脫脂棉一起滅菌；這樣使用應(yīng)該沒問(wèn)題，以網(wǎng)友實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)來(lái)說(shuō)。 

8.槍頭是經(jīng)過(guò)高壓消毒的,直接接觸液體的是槍頭又不是別的,網(wǎng)友覺得剩下的無(wú)非就是無(wú)菌操作的問(wèn)題了,紫外線消毒移液槍就足夠了,還泡啥泡,多余. 

小結(jié)

關(guān)于如何保證移液器的無(wú)菌使用，不少朋友提出用紫外線照射，實(shí)際上并不恰當(dāng)。

首先，移液器的桿柄（通常為白色部分）是有機(jī)高分子化合物，說(shuō)白了就是類似塑料的東西。日常生活中大家知道，露天暴曬的塑料容易變脆。經(jīng)常用大劑量、長(zhǎng)時(shí)間的紫外線照射移液器同樣會(huì)極度加速其老化。我們實(shí)驗(yàn)室曾經(jīng)有一把槍從前面的金屬圈處（圖中a處）斷掉，維修人員給出的解釋之一就是經(jīng)常照射使其脆性增加。

其次，將移液器放在超凈臺(tái)中照射時(shí)，其靠近臺(tái)面的一側(cè)以及被金屬架遮蓋的部分并不能被照到，所以消毒是不徹底的。

有朋友提出將移液器在酒精燈2cm處反復(fù)吸吹幾次以消毒內(nèi)部空氣的方法。這樣操作時(shí)移液器的的末端同樣可能因溫度高而加速老化，天長(zhǎng)日久甚至可能導(dǎo)致局部變形，而一旦末端不是絕對(duì)的圓潤(rùn)，且老化后喪失應(yīng)有的彈性，其與槍頭之間的密封性將不能得到保證。

另外對(duì)于實(shí)驗(yàn)室多人公用的移液器，有時(shí)會(huì)有人不注意就將培養(yǎng)液等吸入移液器桿柄而又未能及時(shí)清理，最后會(huì)在桿柄內(nèi)部形成衛(wèi)生死角，甚至成為污染源。

根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，針對(duì)移液器（或類似結(jié)構(gòu)者）推薦下列使用保養(yǎng)方法：

1.日常消毒，用70%酒精棉球擦拭移液器桿柄表面。使移液器末端（a端）稍低于手持端（c端）并使金屬推桿在下方（如圖），使用吸滿酒精的棉球，還能夠保證移液器的金屬退桿內(nèi)面被酒精覆蓋、消毒。按動(dòng)金屬退桿同時(shí)擦拭被退桿末端（a處）環(huán)柄包住的部分。對(duì)重要實(shí)驗(yàn)若需更加仔細(xì)消毒，可將金屬退桿拔下，徹底擦拭消毒。

2.不定期將金屬退桿拔下，將白色塑料桿柄從b處擰下，用酒精棉球清理?xiàng)U柄內(nèi)部。此時(shí)可能需要使用鈍頭鐵絲等挾持小棉球以便夠著末端較細(xì)的部位。