高效液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而實現(xiàn)對試樣的分析。

　　1、手動進樣器：平時應該注意使用二次蒸餾水和甲醇在裝載狀態(tài)及進樣分析狀態(tài)清洗;如果出現(xiàn)漏液現(xiàn)象，原因極可能為轉(zhuǎn)子密封墊磨損或污染，一般要申請維修或更換配件。

　　2、排液閥：此處不能完全密封或漏液時一般是其中的墊片污染或磨損，可卸下后取出其墊片用異丙醇超聲波清洗或更換墊圈。

　　3、單向閥：如遇到泵壓不穩(wěn)或流動相不能抽取，則可能是單向閥出現(xiàn)問題，卸下用異丙醇超聲波清洗，清洗時須按其安裝的方向放置在小燒杯中，切記不可與安裝方向倒置超洗!

　　4、工作站：出現(xiàn)死機可重起計算機;不正常運行時，首先可更換電腦測試其硬件故障;或在本機上重新插拔接口、重新安裝軟件。

　　5、過濾器：當色譜峰出現(xiàn)異常情況時，有可能是此部件被污染，拆下用異丙醇超洗或更換過濾墊片。

　　6、吸濾頭：特殊情況下可拆下濾頭抽取以判斷其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流動相通過吸濾頭打出以判斷其是否堵塞。若有堵塞情況可用異丙醇超聲波清洗;清洗不成功則需要更換。

　　7、流動相的抽作要求：高效液相級色譜醇，二次蒸餾水，緩沖鹽一定要過濾;流動相脫氣至關(guān)重要(可采用抽濾，超聲波脫氣等方法)

　　8、流通池：在色譜峰不正常時會可能是此部件補污染。可拆卸后取出其中的墊片用異丙醇超洗(可根據(jù)說明書進行操作或申請維修)。

　　9、泵頭：泵頭漏液或出現(xiàn)其它故障一般要申請維修(如漏液，或更換柱塞桿及其密封墊等)

　　泵壓不穩(wěn)1、泵頭有氣泡——流動相脫氣/大流量沖洗泵/用注射器抽取流動動相2、單向閥故障——清洗若上述操作仍不能解決，可用異丙醇沖洗流動(無色譜柱沖洗，由手動進樣器直接進檢測器)，流量為3-4ml/min，沖洗50分鐘左右，然后重新安裝色譜柱，更換流動相平衡，如此再不能解決泵壓波動故障，可申請更換配件。

　　色譜的保養(yǎng)：漏液處理：C18柱絕對不能進蛋白樣品、血樣，生物樣品。

　　要注意柱子的PH值范圍，不得注射強酸強堿的樣品，特別是堿性樣品。

　　長時間不用儀器，應該將柱子取上用堵頭封好保存，注意不能用純水保存柱子，而應該用有機相(如甲醇)保存，因為純水易長霉。

　　流路堵塞問題：堵塞導致壓力太大，按預柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查，并清洗。清洗方法：①以民丙醇作溶劑沖洗②放在異丙醇中超聲波清洗③用10%稀硝酸清洗緩沖鹽的使用：流動相含有鹽分時，做完實驗后一定要進行流路沖洗;首先用水沖洗，打開排液閥用PURG鍵轉(zhuǎn)換出原有含鹽的流動相，然后關(guān)閉排液閥打開泵沖洗全部流路45分鐘以上，如此更換流動相為水和甲醇混合液沖洗全部流路30分鐘(此步驟一般可省去，根據(jù)實驗而論)，最后更換純甲醇沖洗全部流路45分鐘以上。

　　泵頭沖洗;用備件中的針頭和針管分別用蒸餾水和純甲醇沖洗3-5ml。

　　如流動相不含鹽，可對機器定期進行簡單的沖洗維護，根據(jù)實驗多少而定。

　　手動進樣器沖洗;同樣用備件中的針管和專用沖洗針頭對手動進樣器的裝載狀態(tài)和進樣狀態(tài)分別進行沖洗3-4ml的蒸餾水，然后再沖洗3-4ml的純甲醇。確保每次做完實驗，所有流路中充滿純甲醇!