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食品中總砷的測(cè)定方法

[2011/10/17]

  1 主題內(nèi)容與適用范圍

  本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了各類食品中總砷的測(cè)定方法。

  本標(biāo)準(zhǔn)適用于各類食品中總砷的測(cè)定。

  其最低檢出濃度:銀鹽法(測(cè)定用樣品相當(dāng)5g)為0.2mg/kg;砷斑法(測(cè)定用樣品相當(dāng)2g)為0.25mg/kg;硼氫化物還原比色法(測(cè)定用樣品相當(dāng)5g)為0.05mg/kg。

  第一篇 銀鹽法(第一法)

  2 原理

  樣品經(jīng)消化后,以碘化鉀、氯化亞錫將高價(jià)砷還原為三價(jià)砷,然后與鋅粒和酸產(chǎn)生的新生態(tài)氫生成砷化氫,經(jīng)銀鹽溶液吸收后,形成紅色膠態(tài)物,與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。

  3 試劑

  除特別注明外,所用試劑為分析純,水為去離子水。

  3.1 硝酸。

  3.2 硫酸。

  3.3 鹽酸。

  3.4 氧化鎂。

  3.5 無(wú)砷鋅粒。

  3.6 硝酸—高氯酸混合溶液(4+1):量取80mL硝酸,加20mL高氯酸,混勻。

  3.7 硝酸鎂溶液(150g/L):稱取15g硝酸鎂[Mg(NO3)2·6H2O],溶于水中,并稀釋至100mL。

  3.8 碘化鉀溶液(150g/L):貯存于棕色瓶中。

  3.9 酸性氯化亞錫溶液:稱取40g氯化亞錫(SnCl2·2H2O),加鹽酸溶解并稀釋至100mL,加入數(shù)顆金屬錫粒。

  3.10 鹽酸(1+1):量取50mL鹽酸,加水稀釋至100mL。

  3.11 乙酸鉛溶液(100g/L)。

  3.12 乙酸鉛棉花:用乙酸鉛溶液(100g/L)浸透脫脂棉后,壓除多余溶液,并使疏松,在100℃以下干燥后,貯存于玻璃瓶中。

  3.13 氫氧化鈉溶液(200g/L)。

  3.14 硫酸(6+94):量取6.0mL硫酸,加于80mL水中,冷后再加水稀釋至100mL。

  3.15 二乙基二硫代氨基甲酸銀—三乙醇胺—三氯甲烷溶液:稱取0.25g二乙基二硫代氨基甲酸銀[(C2H5)2NCS2Ag],置于乳缽中,加少量三氯甲烷研磨,移入100mL量筒中,加入1.8mL三乙醇胺,再用三氯甲烷分次洗滌乳缽,洗液一并移入量筒中,再用三氯甲烷稀釋至100mL,放置過(guò)夜。濾入棕色瓶中貯存。

  3.16 砷標(biāo)準(zhǔn)溶液:準(zhǔn)確稱取0.1320g在硫酸干燥器中干燥過(guò)的或在100℃干燥2h的三氧化二砷,加5mL氫氧化鈉溶液(200g/L),溶解后加25mL硫酸(6+94),移入1000mL容量瓶中,加新煮沸冷卻的水稀釋至刻度,貯存于棕色玻塞瓶中。此溶液每毫升相當(dāng)于0.10mg砷。

  3.17 砷標(biāo)準(zhǔn)使用液:吸取1.0mL砷標(biāo)準(zhǔn)溶液,置于100mL容量瓶中,加1mL硫酸(6+94),加水稀釋至刻度,此溶液每毫升相當(dāng)于1.0?g砷。

  4 儀器

  4.1 可見(jiàn)分光光度計(jì)。

  4.2 測(cè)砷裝置:見(jiàn)圖1。

  4.2.1 100~150mL錐形瓶:19號(hào)標(biāo)準(zhǔn)口。

  4.2.2 導(dǎo)氣管:管口19號(hào)標(biāo)準(zhǔn)口或經(jīng)堿處理后洗凈的橡皮塞與錐形瓶密合時(shí)不應(yīng)漏氣。管的另一端管徑為1.0mm。

  3.2.3 吸收管:10mL刻度離心管作吸收管用。

  5 樣品消化

  5.1 硝酸高氯酸—硫酸法

  5.1.1 糧食、粉絲、粉條、豆干制品、糕點(diǎn)、茶葉等及其他含水分少的固體食品:稱取5.00g或10.00g的粉碎樣品,置于250~500mL定氮瓶中,先加水少許使?jié)駶?rùn),加數(shù)粒玻璃珠、10~15mL硝酸-高氯酸混合液,放置片刻,小火緩緩加熱,待作用緩和,放冷。沿瓶壁加入5mL或10mL硫酸,再加熱,至瓶中液體開(kāi)始變成棕色時(shí),不斷沿瓶壁滴加硝酸-高氯酸混合液至有機(jī)質(zhì)分解完全。加大火力,至產(chǎn)生白煙,待瓶口白煙冒凈后,瓶?jī)?nèi)液體再產(chǎn)生白煙為消化完全,該溶液應(yīng)澄明無(wú)色或微帶黃色,放冷。在操作過(guò)程中應(yīng)注意防止爆沸或爆炸。

  加20mL水煮沸,除去殘余的硝酸至產(chǎn)生白煙為止,如此處理兩次,放冷。將冷后的溶液移入50mL或100mL容量瓶中,用水洗滌定氮瓶,洗液并入容量瓶中,放冷,加水至刻度,混勻。定容后的溶液每10mL相當(dāng)于1g樣品,相當(dāng)加入硫酸量1mL。

  取與消化樣品相同量的硝酸-高氯酸混合液和硫酸,按同一方法做試劑空白試驗(yàn)。

  5.1.2 蔬菜、水果:稱取25.00g或50.00g洗凈打成勻漿的樣品,置于250~500mL定氮瓶中,加數(shù)粒玻璃珠、10~15mL硝酸-高氯酸混合液,以下按5.1.1自“放置片刻”起依法操作,但定容后的溶液每10mL相當(dāng)于5g樣品,相當(dāng)加入硫酸1mL。

  5.1.3 醬、醬油、醋、冷飲、豆腐、腐乳、醬腌菜等:稱取10.00g或20.00g樣品(或吸取10.0mL或20.0mL液體樣品),置于250~500mL定氮瓶中,加數(shù)粒玻璃珠、5~15mL硝酸-高氯酸混合液。以下按5.1.1自“放置片刻”起依法操作,但定容后的溶液每10mL相當(dāng)于2g或2mL樣品。

  5.1.4 含乙醇飲料或含二氧化碳飲料:吸取10.00mL或20.00mL樣品,置于250~500mL定氮瓶中。加數(shù)粒玻璃珠,先用小火加熱除去乙醇或二氧化碳,再加5~10mL硝酸-高氯酸混合液,混勻后,以下按5.1.1自“放置片刻”起依法操作,但定容后的溶液每10mL相當(dāng)于2mL樣品。

  吸取5~10mL水代替樣品,加與消化樣品相同量的硝酸-高氯酸混合液和硫酸,按相同操作方法做試劑空白試驗(yàn)。

  5.1.5 含糖量高的食品:稱取5.00g或10.0g樣品,置于250~500mL定氮瓶中,先加少許水使?jié)駶?rùn),加數(shù)粒玻璃珠、5~10mL硝酸-高氯酸混合后,搖勻。緩緩加入5mL或10mL硫酸,待作用緩和停止起泡沫后,先用小火緩緩加熱(糖分易炭化),不斷沿瓶壁補(bǔ)加硝酸-高氯酸混合液,待泡沫全部消失后,再加大火力,至有機(jī)質(zhì)分解完全,發(fā)生白煙,溶液應(yīng)澄明無(wú)色或微帶黃色,放冷。以下按5.1.1自“加20mL水煮沸”起依法操作。

  5.1.6 水產(chǎn)品:取可食部分樣品搗成勻漿,稱取5.00g或10.0g(海產(chǎn)藻類、貝類可適當(dāng)減少取樣量),置于250~500mL定氮瓶中,加數(shù)粒玻璃珠,5~10mL硝酸-高氯酸混合液,混勻后,以下按5.1.1自“沿瓶壁加入5mL或10mL硫酸”起依法操作。

  5.2 硝酸-硫酸法

  以硝酸代替硝酸-高氯酸混合液進(jìn)行操作。

  5.3 灰化法

  5.3.1 糧食、茶葉及其他含水分少的食品:稱取5.00g磨碎樣品,置于坩堝中,加1g氧化鎂及10mL硝酸鎂溶液,混勻,浸泡4h。于低溫或置水浴鍋上蒸干,用小火炭化至無(wú)煙后移入馬弗爐中加熱至550℃,灼燒3~4h,冷卻后取出。加5mL水濕潤(rùn)后,用細(xì)玻棒攪拌,再用少量水洗下玻棒上附著的灰分至坩堝內(nèi)。放水浴上蒸干后移入馬弗爐550℃灰化2h,冷卻后取出。

  加5mL水濕潤(rùn)灰分,再慢慢加入10mL鹽酸(1+1),然后將溶液移入50mL容量瓶中,坩堝用鹽酸(1+1)洗滌3次,每次5mL,再用水洗滌3次,每次5mL,洗液均并入容量瓶中,再加水至刻度,混勻。定容后的溶液每10mL相當(dāng)于1g樣品,其加入鹽酸量不少于(中和需要量除外)1.5mL。全量供銀鹽法測(cè)定時(shí),不必再加鹽酸。

  按同一操作方法做試劑空白試驗(yàn)。

  5.3.2 植物油:稱取5.00g樣品,置于50mL瓷坩堝中,加10g硝酸鎂,再在上面覆蓋2g氧化鎂,將坩堝置小火上加熱,至剛冒煙,立即將坩堝取下,以防內(nèi)容物溢出,待煙小后,再加熱至炭化完全。將坩堝移至馬弗爐中,550℃以下灼燒至灰化完全,冷后取出。

  加5mL水濕潤(rùn)灰分,再緩緩加入15mL鹽酸(1+1),然后將溶液移入50mL容量瓶中,坩堝用鹽酸(1+1)洗滌5次,每次5mL,洗液均并入容量瓶中,加鹽酸(1+1)至刻度,混勻。定容后的溶液每10mL相當(dāng)于1g樣品,相當(dāng)于加入鹽酸量(中和需要量除外)1.5mL。

  按同一操作方法做試劑空白試驗(yàn)。

  5.3.3 水產(chǎn)品:取可食部分樣品搗成勻漿,稱取5.00g置于坩堝中,加1g氧化鎂及10mL硝酸鎂溶液,混勻,浸泡4h。以下按5.3.1自“于低溫或置水浴鍋上蒸干”起依法操作。

  6 分析步驟

  吸取一定量的消化后的定容溶液(相當(dāng)于5g樣品)及同量的試劑空白液,分別置于150mL錐形瓶中,補(bǔ)加硫酸至總量為5mL,加水至50~55mL。

  6.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

  吸取0,2.0,4.0,6.0,8.0,10.0mL砷標(biāo)準(zhǔn)使用液(相當(dāng)0,2.0,4.0,6.0,8.0,10.0?g),分別置于150mL錐形瓶中,加水至40mL,再加10mL硫酸(1+1)。

  6.2 用濕法消化液

  于樣品消化液,試劑空白液及砷標(biāo)準(zhǔn)溶液中各加3mL碘化鉀溶液(150g/L),0.5mL酸性氯化亞錫溶液,混勻,靜置15min。各加入3g鋅粒,立即分別塞上裝有乙酸鉛棉花的導(dǎo)氣管,并使管尖端插入盛有4mL銀鹽溶液的離心管中的液面下,在常溫下反應(yīng)45min后,取下離心管,加三氯甲烷補(bǔ)足4mL。用1cm比色杯,以零管調(diào)節(jié)零點(diǎn),于波長(zhǎng)520nm處測(cè)吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

  6.3 用灰化法消化液

  取灰化法消化液及試劑空白液分別置于150mL錐形瓶中。吸取0,2.0,4.0,6.0,8.0,10.0mL砷標(biāo)準(zhǔn)使用液(相當(dāng)0,2.0,4.0,6.0,8.0,10.0?g砷),分別置于150mL錐形瓶中,加水至43.5mL,再加6.5mL鹽酸。以下按6.2自“于樣品消化液”起依法操作。

  7 計(jì)算

  式中:X——樣品中砷的含量,mg/Kg或mg/L;

  m1——測(cè)定用樣品消化液中砷的質(zhì)量,?g;

  m2——試劑空白液中砷的質(zhì)量,?g;

  m——樣品質(zhì)量(體積),g(mL);

  V1——樣品消化液的總體積,mL;

  V2——測(cè)定用樣品消化液的體積,mL。

  結(jié)果的表述:報(bào)告算術(shù)平均值的二位有效數(shù)。

  8 允許差

  相對(duì)相差≤10%。

  第二篇 砷斑法(第二法)

  9 原理

  樣品經(jīng)消化后,以碘化鉀、氯化亞錫將高價(jià)砷還原為三價(jià)砷,然后與鋅粒和酸產(chǎn)生的新生態(tài)氫生成砷化氫,再與溴化汞試紙生成黃色至橙色的色斑,與標(biāo)準(zhǔn)砷斑比較定量。

  10 試劑

  10.1 同銀鹽法3.1~3.14,3.16,3.17。

  10.2 溴化汞-乙醇溶液(50g/L):稱取25g溴化汞用少量乙醇溶解后,再定容至500mL。

  10.3 溴化汞試紙:將剪成直徑2cm的圓形濾紙片,在溴化汞乙醇溶液(50g/L)中浸漬1h以上,保存于冰箱中,臨用前取出置暗處陰干備用。

  11 儀器

  11.1 測(cè)砷裝置:見(jiàn)圖2。

  11.1.1 100mL錐形瓶。

  11.1.2 橡皮塞:中間有一孔。

  11.1.3 玻璃測(cè)砷管:全長(zhǎng)18cm,上粗下細(xì),自管口向下至14cm一段的內(nèi)徑為6.5mm,自此以下逐漸狹細(xì),末端內(nèi)徑約為1~3mm,近末端1cm處有一孔,直徑2mm,狹細(xì)部分緊密插入橡皮塞中,使下部伸出至小孔恰在橡皮塞下面。上部較粗部分裝放乙酸鉛棉花,長(zhǎng)5~6cm,上端至管口處至少3cm,測(cè)砷管頂端為圓形扁平的管口上面磨平,下面兩側(cè)各有一鉤,為固定玻璃帽用。

  11.1.4 玻璃帽:下面磨平,上面有彎月形凹槽,中央有圓孔,直徑6.5mm。使用時(shí)將玻璃帽蓋在測(cè)砷管的管口,使圓孔互相吻合,中間夾一溴化汞試紙光面向下,用橡皮圈或其他適宜的方法將玻璃帽與測(cè)砷管固定。

  12 樣品消化

  同第5章。

  13 分析步驟

  吸取一定量第5章中樣品消化后定容的溶液(相當(dāng)于2g糧食,4g蔬菜、水果,4mL冷飲,5g植物油,其他樣品參照此量)及同量的試劑空白液分別置于測(cè)砷瓶中,加5mL碘化鉀溶液(150g/L)、5滴酸性氯化亞錫溶液及5mL鹽酸(樣品如用硝酸-高氯酸-硫酸或硝酸-硫酸消化液,則要減去樣品中硫酸毫升數(shù);如用灰化法消化液,則要減去樣品中鹽酸毫升數(shù)),再加適量水至35mL(植物油不再加水)。

  吸取0,0.5,1.0,2.0mL砷標(biāo)準(zhǔn)使用液(相當(dāng)0,0.5,1.0,2.0?g砷),分別置于測(cè)砷瓶中,各加

  5mL碘化鉀溶液(150g/L),5滴酸性氯化亞錫溶液及5mL鹽酸,各加水至35mL(測(cè)定植物油時(shí)加水至60mL)。

  于盛樣品消化液,試劑空白液及砷標(biāo)準(zhǔn)溶液的測(cè)砷瓶中各加3g鋅粒,立即塞上預(yù)先裝有乙酸鉛棉花及溴化汞試紙的測(cè)砷管,于25℃放置1h,取出樣品及試劑空白的溴化汞試劑紙與標(biāo)準(zhǔn)砷斑比較。

  14 計(jì)算

  同第7章。

  結(jié)果的表述:算術(shù)平均值的二位有效數(shù)。

  15 允許差

  相對(duì)相差≤20%。

  第三篇 硼氫化物還原比色法(第三法)

  16 原理

  樣品經(jīng)消化,其中砷以五價(jià)形式存在。當(dāng)溶液氫離子濃度大于1.0mol/L時(shí),加入碘化鉀-硫脲并結(jié)合加熱,能將五價(jià)砷還原為三價(jià)砷。在酸性條件下,硼氫化鉀將三價(jià)砷還原為負(fù)三價(jià),形成砷化氫氣體,導(dǎo)入吸收液中呈黃色,黃色深淺與溶液中砷含量成正比。與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。

  17 試劑

  17.1 碘化鉀(500g/L)+硫脲溶液(50g/L)(1+1)。

  17.2 氫氧化鈉溶液(400g/L)和氫氧化鈉溶液(100g/L)。

  17.3 硫酸(1+1)。

  17.4 吸收液

  17.4.1 硝酸銀溶液(8g/L):稱取4.07g硝酸銀于500mL燒杯中,加入適量水溶解后加入30mL硝酸,加水至500mL,貯于棕色瓶中。

  17.4.2 聚乙烯醇溶液(4g/L):稱取0.4g聚乙烯醇(聚合度1500~1800)于小燒杯中,加入100mL水,沸水浴中加熱,攪拌至溶解,保溫10min,取出放冷備用。

  17.4.3 吸收液:取17.4.1和17.4.2各一份,加入二份體積的乙醇(95%),混勻作為吸收液。使用時(shí)現(xiàn)配。

  17.5 硼氫化鉀片:將硼氫化鉀與氯化鈉按1∶4質(zhì)量比混合磨細(xì),充分混勻后在壓片機(jī)上制成直徑10mm,厚4mm的片劑,每片為0.5g。避免在潮濕天氣時(shí)壓片。

  17.6 乙酸鉛(100g/L)棉花:將脫脂棉泡于乙酸鉛溶液(100g/L)中,數(shù)分鐘后擠去多余溶液,攤開(kāi)棉花,80℃烘干后貯于廣口玻璃瓶中。

  17.7 檸檬酸(1.0mol/L)-檸檬酸銨(1.0mol/L):稱取192g檸檬酸、243g檸檬酸銨,加水溶解后稀釋至1000mL。

  17.8 砷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:稱取經(jīng)105℃干燥1h并置干燥器中冷卻至室溫的三氧化二砷(As2O3)0.1320g于100mL燒杯中,加入10mL氫氧化鈉溶液(2.5mol/L),待溶解后加入5mL高氯酸、5mL硫酸,置電熱板上加熱至冒白煙,冷卻后,轉(zhuǎn)入1000mL容量瓶中,并用水稀釋定容至刻度。此溶液每毫升含砷(五價(jià))0.100mg。

  17.9 砷標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液:吸取1.00mL砷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液于100mL容量瓶中,加水稀釋至刻度。此溶液每毫升含砷(五價(jià))1.00?g。

  17.10 甲基紅指示劑(2g/L):稱取0.1g甲基紅溶解于50mL乙醇(95%)中。

  18 儀器

  18.1 可見(jiàn)分光光度計(jì)。

  18.2 砷化氫發(fā)生裝置(見(jiàn)圖1)。

  19 分析步驟

  19.1 樣品處理

  19.1.1 糧食類食品:稱取5.00g樣品于250mL三角燒瓶中,加入5.0mL高氯酸、20mL硝酸、2.5mL硫酸(1+1),放置數(shù)小時(shí)后(或過(guò)夜),置電熱板上加熱,若溶液變?yōu)樽厣瑧?yīng)補(bǔ)加硝酸使有機(jī)物分解完全,取下放冷,加15mL水,再加熱至冒白煙,取下,以20mL水分?jǐn)?shù)次將消化液定量轉(zhuǎn)入100mL砷化氫發(fā)生瓶中。同時(shí)作空白消化。

  19.1.2 蔬菜、水果類:稱取10.00~20.00g樣品于250mL三角燒瓶中,加入3mL高氯酸、20mL硝酸、2.5mL硫酸(1+1)。以下按19.1.1操作。

  19.1.3 動(dòng)物性食品(海產(chǎn)品除外):稱取5.00~10.00g樣品于250mL三角燒瓶中,以下按19.1.1操作。

  19.1.4 海產(chǎn)品:稱取0.100~1.00g樣品于250mL三角燒瓶中,加入2mL高氯酸、10mL硝酸、2.5mL硫酸(1+1),以下按19.1.1操作。

  19.1.5 含乙醇或二氧化碳的飲料:吸取10.0mL樣品于250mL三角燒瓶中,低溫加熱除去乙醇或二氧化碳后加入2mL高氯酸、10mL硝酸、2.5mL硫酸(1+1),以下按19.1.1操作。

  19.1.6 醬油類食品:吸取5.0~10.0mL代表性樣品于250mL三角燒瓶中,加入5mL高氯酸、20mL硝酸、2.5mL硫酸(1+1),以下按19.1.1操作。

  19.2 標(biāo)準(zhǔn)系列的制備

  于6只100mL砷化氫發(fā)生瓶中,依次加入砷標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液0,0.25,0.5,1.0,2.0,3.0mL(相當(dāng)于砷0,0.25,0.5,1.0,2.0,3.0?g),分別加水至3mL,再加2.0mL硫酸(1+1)。

  19.3 樣品及標(biāo)準(zhǔn)的測(cè)定

  于樣品及標(biāo)準(zhǔn)砷化氫發(fā)生瓶中,分別加入0.1g抗壞血酸,2.0mL碘化鉀(500g/L)—硫脲溶液(50g/L),置沸水浴中加熱5min(此時(shí)瓶?jī)?nèi)溫度不得超過(guò)80℃),取出放冷,加入甲基紅指示劑(2g/L)1滴,加入約3.5mL氫氧化鈉溶液(400g/L),以氫氧化鈉溶液(100g/L)調(diào)至溶液剛呈黃色,加入1.5mL檸檬酸(1.0mol/L)—檸檬酸銨溶液(1.0mol/L),加水至40mL,加入一粒硼氫化鉀片劑,立即通過(guò)塞有乙酸鉛棉花的導(dǎo)管與盛有4.0mL吸收液的吸收管相連接,不時(shí)搖動(dòng)砷化氫發(fā)生瓶,反應(yīng)5min后再加入一粒硼氫化鉀片劑,繼續(xù)反應(yīng)5min。取下吸收管,用1cm比色杯,在400nm波長(zhǎng),以標(biāo)準(zhǔn)管零管調(diào)吸光度為零,測(cè)定各管吸光度。將標(biāo)準(zhǔn)系列各管砷含量對(duì)吸光度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或計(jì)算回歸方程。

  20 計(jì)算

  式中:X——樣品中砷的含量,mg/kg或mg/L;

  m1——測(cè)定用消化液從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的質(zhì)量,?g;

  m——樣品質(zhì)量或體積,g或mL。

  結(jié)果的表述:報(bào)告算術(shù)平均值的二位有效數(shù)。

  21 允許差

  相對(duì)相差≤15%。

  附加說(shuō)明:

  本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部衛(wèi)生監(jiān)督司提出。

  本標(biāo)準(zhǔn)第一法由中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生研究所、青海省衛(wèi)生防疫站負(fù)責(zé)起草;第二法由衛(wèi)生部食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)所負(fù)責(zé)起草;第三法由華西醫(yī)科大學(xué)負(fù)責(zé)起草。

  本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部委托技術(shù)歸口單位衛(wèi)生部食品衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)所負(fù)責(zé)解釋。

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