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生物安全柜的幾個誤區(qū)及引發(fā)的安全問題分析

[2011/7/5]

  生物安全柜是一種對操作人員、樣品和環(huán)境提供安全保護(hù)的安全設(shè)備,也是實驗室生物安全中一級防護(hù)屏障中最基本的安全防護(hù)設(shè)備。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展和人們對生物安全意識的提高,生物安全柜在實驗室、醫(yī)院及研究單位的應(yīng)用日益廣泛,但是在人們在觀念里認(rèn)為是最簡單的排風(fēng)設(shè)備,選型、安裝、使用等方面中存在很多問題和誤區(qū),給生物安全防護(hù)、避免實驗室感染帶來極大的隱。

  2003年暴發(fā)流行SARS和高致病禽流感,特別是2003-2004年三起實驗室SARS-CoV感染事件發(fā)生,已經(jīng)引起了我國政府和廣大科學(xué)工作者的高度重視。

  目前,我國生物安全問題形勢嚴(yán)峻,必須采取措施,扭轉(zhuǎn)局面,以下對生物安全柜目前存在的的有關(guān)問題、誤區(qū)進(jìn)行詳細(xì)分析,引以為患。

  醫(yī)療單位生物安全觀念淡漠,醫(yī)院臨床診檢、化驗室、實驗室等所接受的各種病人血液、黏液和各種標(biāo)本都可能含有各種致病因子,如肝炎病毒、AIDS病毒等已知和未知的病原體,給工作人員帶來很大的威脅。

  很多臨床檢驗人員沒有采取任何防護(hù)措施,或采取措施不到位,例如目前大多數(shù)化驗室人員工作時只佩帶一次性乳膠手套,即使戴口罩也是無紡布口罩;用潔凈工作臺代替生物安全柜;工作人員對生物安全柜的選擇、操作等知識缺乏;生物安全柜安裝、排風(fēng)安裝存在諸多問題;開展科研工作缺乏危險度評估等等。

  實驗室國外學(xué)者Pike對3921例實驗室相關(guān)感染進(jìn)行統(tǒng)計發(fā)現(xiàn),不明原因的實驗室感染只占18%,不明原因的感染占到了82%。

  經(jīng)過近年來的研究認(rèn)為其中65%的不明原因感染是因為病原微生物形成感染性氣溶膠隨空氣擴散,實驗室工作人員吸入了污染的空氣感染的。實驗室中,許多操作都可以產(chǎn)生氣溶膠,有人對239種操作進(jìn)行了測試,其中239種操作可以產(chǎn)生氣溶膠,占86.6%。在現(xiàn)在的實驗室中,像攪拌、振蕩、撞擊、離心、超聲波破碎、接種等都可產(chǎn)生氣溶膠,實驗室微生物氣溶膠的產(chǎn)生,大多數(shù)是在不知不覺中形成的。

  中國從1964-1988年發(fā)生20多例漢坦病毒感染事件,2003年國家CDC的SARS病毒感染事件故給我們敲起了警鐘,因此,要牢固樹立生物安全意識。

  誤區(qū)一:潔凈工作臺代替生物安全柜

  經(jīng)過對浙江省內(nèi)各級醫(yī)院調(diào)查發(fā)現(xiàn),目前仍有很多醫(yī)院還在大量使用醫(yī)用潔凈工作臺,很多操作人員認(rèn)為這兩種設(shè)備外形相同,作用大同小異,并認(rèn)為他們操作的樣本都是普通的樣本,不具有高致病性。其實,生物安全柜和潔凈工作臺具有本質(zhì)的差別,潔凈工作臺將通過高效過濾器的凈化空氣向下吹過工作區(qū),用來保護(hù)樣品,由于工作區(qū)是正壓區(qū),氣流通過操作窗口外溢,只保護(hù)樣品,而對操作人員和環(huán)境不提供保護(hù),如操作含有任何已知或潛在致病氣溶膠,都會給操作人員帶來極大隱患。生物安全柜是一種負(fù)壓凈化工作臺,可以防止操作者和環(huán)境暴露于實驗室過程中產(chǎn)生的有害氣溶膠,是傳染性微生物的牢籠,正確地操作生物安全柜,能夠完全保護(hù)操作人員、樣品、工作環(huán)境。因此,醫(yī)院臨床檢驗、診斷、病理分析、腫瘤藥物的配制等工作及相關(guān)生物醫(yī)學(xué)研究所、實驗室都應(yīng)使用生物安全柜。

  2004年國家發(fā)布的國務(wù)院424號令和國家標(biāo)準(zhǔn)GB19489-2004都明確指出生物安全柜是保護(hù)工作人員必不可缺少的主要安全設(shè)備。因此,用潔凈工作臺代替生物安全柜的這種局面應(yīng)盡快改變,否則,給廣大醫(yī)護(hù)人員、實驗科研人員帶來極大的隱患。同時,為了安全起見,各醫(yī)療單位及相關(guān)實驗室應(yīng)重新對實驗室微生物危險度進(jìn)行評估,如有潛在危險,應(yīng)及時替換原有潔凈工作臺,并根據(jù)不同需要選配生物安全柜。

  誤區(qū)二:超前化

  生物安全柜選型不當(dāng),根據(jù)結(jié)構(gòu)設(shè)計、排風(fēng)比例和保護(hù)對象和程度不同,生物安全柜分為Ⅰ級、Ⅱ級和Ⅲ級,其中Ⅱ級又分為A2、B2型。不同級別的生物安全實驗室應(yīng)選用不同級別的生物安全柜,也可根據(jù)要保護(hù)、防護(hù)的不同類型來選擇適當(dāng)?shù)陌踩。在操作少量揮發(fā)性化學(xué)試劑或放射性核素時,可選擇Ⅱ級B2型生物安全柜;操作大量揮發(fā)性化學(xué)試劑或放射性核素時,必須使用Ⅱ級B2型生物安全柜。目前全世界應(yīng)用最廣的是Ⅱ級A2型安全柜,它能夠滿足醫(yī)院的一般用途,另外,從節(jié)能角度也較為經(jīng)濟(jì)。在實際工作中,很多單位認(rèn)為設(shè)備選型應(yīng)具有一定的超前性,常常在A2型能滿足應(yīng)用的情況下選用B2型,造成問題很多。首先B2型安全柜排氣量達(dá)到每小時1600立方(型號不同有差異),普通家用排氣扇排氣量約為每小時80立方,如果房間沒有足夠的補充風(fēng)量,安全柜根本無法正常工作,有很多實驗室無奈只好打開門開機,這不符合實驗室規(guī)范要求;此外,室內(nèi)空氣大量外排,要保證實驗室內(nèi)溫度滿足實驗要求,需要空調(diào)和加熱器的負(fù)荷非常大,現(xiàn)已建好的實驗室根本無法滿足,也造成能源浪費。還有些單位在選擇安全柜時被一些所謂“新功能“的廣告宣傳誤導(dǎo),例如安全柜的帶有電動前窗就是一大誤區(qū)。因為安全柜在無雙路供電系統(tǒng)情況下,如果突然停電,電動窗無法關(guān)閉,有害物外泄會造成污染;而且,不論電動還是手動,操作高度都是固定的,可見,這種電動功能意義不大并有很大危害。安全柜的選擇應(yīng)主要從安全柜的性能考慮,如高效過濾器、風(fēng)路設(shè)計、報警裝置、負(fù)壓保護(hù)等指標(biāo)比較安全柜的優(yōu)略,而不應(yīng)被廣告的宣傳所誤導(dǎo)。

  誤區(qū)三:安全柜安裝問題多多

  現(xiàn)有實驗室購置安全柜,一般在房間騰出一小塊空地安放,存在問題很多,安裝位置不當(dāng),會造成污染。生物安全柜兩側(cè)、后側(cè)應(yīng)留30 cm,頂部留出足夠30~34 cm的空間;為減少氣流擾動,保證安全柜正常工作,生物安全柜應(yīng)放置在遠(yuǎn)離實驗室入口、門窗、暖氣、走道,避開送風(fēng)口,避免外界氣流對柜內(nèi)氣流造成擾動。生物安區(qū)柜放置的房間必須有足夠的送風(fēng)量,Ⅱ級A2排氣量約在700~1200 m3/h,B2則在1000~1600 m3/h,有的型號更高,如果沒有足夠的補充送風(fēng),生物安全柜所在房間成為高負(fù)壓狀態(tài), 生物安全柜無法正常工作。很多實驗室購置Ⅱ級A2生物安全柜后,認(rèn)為排風(fēng)管道接到室外比排到室內(nèi)安全。其實,生物安全柜排風(fēng)出口帶有高效過濾器,所排出的氣體被證明是安全的,對室內(nèi)環(huán)境沒有影響;另外,將室內(nèi)舒適工作環(huán)境的潔凈空氣排到室外會大大增加運行成本,因此,除了操作危險度較高的實驗對象或能產(chǎn)生化學(xué)氣味的化學(xué)試劑,Ⅱ級A2生物安全柜排風(fēng)排到室內(nèi)是安全可行的。Ⅱ級A2型生物安全柜采用硬連接,這種連接方式以前被廣泛使用, A2型生物安全柜使用密閉硬管連接到帶抽風(fēng)機的排風(fēng)系統(tǒng)時,其安全運行完全依賴于排風(fēng)系統(tǒng),如當(dāng)排風(fēng)的速度升高或降低,生物安全柜內(nèi)不平衡發(fā)生變化,會產(chǎn)生污染環(huán)境、樣品的嚴(yán)重后果。在美國NSF49:2002標(biāo)準(zhǔn)中禁止Ⅱ級A2生物安全柜使用密閉硬管連接。如果Ⅱ級A2安全柜外排氣體時,建議排風(fēng)管采用套管連接,套管安裝在生物安全柜的排風(fēng)管上,與安全柜高效過濾器之間保留2.5 cm的縫隙,以便讓房間的空氣也能吸入到建筑物的排風(fēng)系統(tǒng)中,這種連接方式是最安全的連接方式,柜內(nèi)的氣流平衡獨立與排風(fēng)系統(tǒng),無論排風(fēng)系統(tǒng)如何波動柜內(nèi)氣流平衡都不會受到影響。Ⅱ級B2必須通過硬管連接,密封地連接到排風(fēng)系統(tǒng)上,排風(fēng)系統(tǒng)的排風(fēng)量和靜壓必須與安全柜制定要求一致。在安裝有多臺Ⅱ級B型生物安全柜時,應(yīng)各自使用獨立的排風(fēng)管道,不能共用排風(fēng)管道。

  誤區(qū)四:有生物安全柜,就一切“OK”了

  安全柜的使用和局限應(yīng)向每個操作者說明,嚴(yán)格按要求操作,如使用提前開機“自凈”、柜內(nèi)物品的擺放合理、定期保養(yǎng)驗證等。當(dāng)操作失誤或發(fā)生泄漏、破損時,生物安全柜不能夠保護(hù)操作者。生物安全柜前的空氣幕很脆弱,極易受到干擾而造成污染。實驗中不能隨意開啟前窗的位置,操作動作緩和,手臂避免頻繁出入安全柜,以防止打擾氣流。在安全柜工作時,開關(guān)房門、人員在房間內(nèi)走動、甚至在操作人員背后咳嗽等都會形成湍流而增加微生物氣溶膠溢出量,而造成實驗室污染。國外學(xué)者Oster曾報道,工作人員在安全柜內(nèi)用吸管吸取立克次體懸液,另外一人在柜旁與之談話14 分鐘后即感染發(fā)病。有很多污染事件是因為實驗人員違反操作規(guī)程、注意力不集中、操作動作不穩(wěn)定、操作方法或器材不當(dāng)所致。在操作方法上或器材上略加改進(jìn),如將針頭從橡皮塞的瓶中抽出,用酒精棉球圍住瓶口比不用產(chǎn)生的氣溶膠少99%。因此,操作人員必須牢固樹立安全意識,養(yǎng)成良好操作習(xí)慣,杜絕違規(guī)操作,嚴(yán)格遵照微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程和生物安全實驗室操作規(guī)程,并使用規(guī)范的實驗器材。個人防護(hù)是防止實驗室氣溶膠感染的最后一道防護(hù),通常由物理防護(hù)和疫苗免疫兩種,物理防護(hù)主要是對呼吸道和眼睛的防護(hù),如防風(fēng)鏡、口罩、防護(hù)面罩、正壓頭盔和正壓工作服等。生物安全柜投入使用后,其管理是一項重要的工作,也是一項薄弱的環(huán)節(jié),由于設(shè)備人員、實驗人員責(zé)任界限不清,疏于管理,給實驗室安全帶來極大隱患,必須建立科學(xué)的管理制度,嚴(yán)格執(zhí)行,責(zé)任落實到人,并進(jìn)行監(jiān)督,確保實驗室安全。

  誤區(qū)五:生物安全柜監(jiān)控成空白

  現(xiàn)在生物安全柜大量應(yīng)用在醫(yī)療衛(wèi)生、疾病預(yù)防與控制、食品衛(wèi)生、生物制藥,環(huán)境監(jiān)測以及各級實驗室等領(lǐng)域,是保障生物安全和環(huán)境安全的重要物質(zhì)基礎(chǔ),是屬于“民生”計量的范疇。

  目前大多數(shù)用戶對生物安全柜的檢測性能不夠了解,不少用戶認(rèn)為只要生物安全柜能轉(zhuǎn),就一直用下去,成為很大的隱患;而只有極少部分用戶雖然了解生物安全柜的重要性,但因為缺乏有資質(zhì)的機構(gòu)統(tǒng)一開展生物安全柜的檢測工作,變得有心無力,最后只好不了了之。生物安全柜在安裝完畢、移動位置后、檢修后、更換高效過濾器后都必須進(jìn)行現(xiàn)場重新檢測;另外,還應(yīng)進(jìn)行一年一度的常規(guī)檢查及安全評估。目前,廣大用戶自己還無法解決這一問題,現(xiàn)實情況是廠家既賣產(chǎn)品又出檢測報告,既不科學(xué),也不公正。所以建議用戶在招標(biāo)購買安全柜時,與廠家協(xié)商年檢問題;另外,建議用戶組織相關(guān)專業(yè)人員經(jīng)過培訓(xùn)開展必要的檢測工作,以解決生物安全柜監(jiān)測、檢測、年檢的難題。

  開展生物安全柜的檢測和評估,需要具有資質(zhì)的專業(yè)人員和專業(yè)設(shè)備才能進(jìn)行。所以建議在參照國際和國內(nèi)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)(歐盟EN12469∶2000、美國NSF/ANSI 49-2002、中國JG 170-2005和YY 0569-2005)的基礎(chǔ)上,結(jié)合國內(nèi)生物安全柜行業(yè)實際情況,保證檢測質(zhì)量的前提下,簡化檢測項目,提高可操作性,并對以往容易忽視的檢測項目,提出具體的量化指標(biāo),多建立一些有實力的獨立第三方檢測機構(gòu),為國內(nèi)眾多企事業(yè)單位提供質(zhì)優(yōu)價廉的生物安全柜檢測服務(wù)已勢在必行。

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